Портал промышленного скотоводства

Методы искусственного осеменения коров

Основные

• Оптимальное время и кратность осеменения
• Способы выявления половой охоты коров
• Способы осеменения коров и телок:
• Эпицервикальный способ осеменения
• Маноцервикальный способ осеменения
• Визоцервикальный способ осеменения
• Ректоцервикальный способ осеменения
• Способы диагностики стельности коров и телок

Оптимальное время и кратность осеменения

Выбор сроков осеменения самок - один из наиболее важных факторов при организации и проведении искусственного осеменения. Оптимальным сроком осеменения является период, наиболее благоприятный для встречи спермиев с яйцеклеткой. При выборе срока осеменения при искусственном осеменении играют роль три фактора:

Во-первых, способность яйцеклетки к оплодотворению довольно ограничен (приблизительно 5-10 часов). После этого яйцеклетка стареет, что уменьшает ее вероятность слияния со спермием и увеличивает вероятность ненормального развития и гибели. Это обстоятельство определяет то, что спермии к моменту овуляции яйцеклетки должны уже находиться в половых путях животного.

Во-вторых, исследования показали, что для соединения спермия с яйцеклеткой самому спермию необходимо пройти в половых путях самки некоторую подготовительную процедуру, именуемую капацитацией. Это своего рода подготовительная процедура подготовки внешних структур спермия к прохождению короны радиаты яйцеклетки. Продолжительность этой процедуры у сельскохозяйственных животных составляет приблизительно 5-6 часов. Это обстоятельство требует необходимости введения спермы в половые пути коров за 5-6 часов до предполагаемой овуляции.

В-третьих, жизнеспособность спермиев в половых путях самки при естественном покрытии самцом составляет, в среднем, 24-48 часов. Жизнеспособность замороженно-оттаянных или свежеразбавленных спермиев намного ниже, в среднем, 12 часов. Этот факт требует введения спермы не более чем за 12 часов до предполагаемой овуляции.

Указанные три фактора определяют необходимость точного знания сроков овуляции предовуляторного фолликула у коров и телок. У самок крупного рогатого скота в отличие от других видов сельскохозяйственных животных овуляция происходит в стадию торможения, через 10-12 часов после окончания половой охоты, у 80% животных в ранние утренние часы (3-4 часа утра).
Все указанные факторы определяют оптимальный срок искусственного осеменения коров и телок в конце половой охоты. Так как у 70% животных средняя продолжительность половой охоты составляет 12 часов (с колебаниями от 8 до 20 часов), то, если начало охоты приходится на утренние часы, таких животных осеменяют вечером (в 17-19 часов вечера). Если же начало охоты фиксируют в вечернее время, таких животных осеменяют рано утром (в 5-6 часов утра).

При осеменении дойных коров следует соблюдать следующее правило:

- проводить осеменение до дойки или через два часа после нее. Это связано с тем, что при доении в головном мозге возникает доминанта, препятствующая осуществлению всасывающей функции шейки матки, что снижает результативность искусственного осеменения.

Важным фактором плодотворного осеменения животных наряду с выбором времени осеменения является кратность осеменения. В соответствии с инструкцией коров и телок осеменяют дважды: первый раз после выявления у них половой охоты и второй раз - через 10-12 часов. В случае продолжения охоты дополнительные осеменения проводят через каждые 12 часов, вплоть до окончания признаков половой охоты.

Способы выявления половой охоты коров.

Наиболее точным признаком готовности самки к спариванию и оптимальным сроком осеменения является период половой охоты при наличии течки и полового возбуждения.

В настоящее время существует несколько способов определения половой охоты и других признаков полового возбуждения у коров и телок.

Способ выявления	Применяемые вспомо- гательные средства	Наблюдаемые явления при наличии половой охоты	Недостатки данного способа
Визуальный	Визуальное наблюдение за поведением животных.	Животные проявляют беспокойство, издают звуки, переступают с ноги на ногу, оглядываются, у них снижен аппетит. Самки проявляют поисковую реакцию на самца. Животные обнюхивают и облизывают эрогенные зоны (вымя, клитор, область паха), допускают прыжки на себя и спокойно стоят при этом – рефлекс неподвижности. В начальный период полового возбуждения из половой щели истекает слегка беловатая слизь, иногда с белыми прожилками, которая к середине охоты становится прозрачной, а в конце охоты начинает слегка мутнеть и загустевать.	Невыявляемость половой охоты у животных с "тихой" охотой и у животных с больными конечностями.
Рефлексологи- ческий	Использование быка-пробника (вазоэк- томированого или с отведенным в сторону половым членом).	Животные допускают прыжки быка на себя, проявляют общую поисковую реакцию на самца.	Применение пробника на привязи , которого подводят поочередно к привязанным коровам, нередко дает ошибки, т.к. часто стельные коровы принимают быка без заметного сопротивления и, наоборот, молодые телки отбивают пробника при наличии охоты.
Вагинальный	Осмотр влагалища и шейки матки при помощи влагалищного зеркала.	Наблюдается набухшая и покрасневшая слизистая оболочка влагалища, канал шейки расслаблен и приоткрыт, из него истекает слизь, которая скапливается на дне влагалища, а затем самотеком вытекает из половой щели.	Необходимость фиксации животного при осмотре. У некоторых животных, особенно молодых раскрытие шейки матки выражено не сильно. Кроме того, в зимние месяцы покраснение стенок влагалища не всегда очевидно.
Ректальный	Прощупывание яичников через прямую кишку (ректу) с целью определения степени развития предовуляторного фолликула.	Зрелый фолликул четко выступает на поверхности яичника. При осторожном надавливании пальцем чувствуется движение фолликулярной жидкости (флюктуация), стенки фолликула мягко вдавливаются. Незрелый фолликул незначительно выступает на поверхности яичника и твердый на ощупь.	Необходимость хорошей квалификации оператора и частых повторений манипуляций. Возможность разрыва фолликула и выхода яйцеклетки с ее дальнейшей утратой при неосторожной манипуляции с яичниками.
Гормональный	Определение содержания гормона прогестерона в крови, моче или молоке животных.	Содержание прогестерона.	Необходимость наличия специальных реактивов. Кроме того, при персистентном желтом теле содержание прогестерона повышено, что часто интерпретируется как стельность.
Электрометри- ческий	Измерение электрического сопротивления слизистой оболочки преддверия влагалища.	Время максимального выделения слизи сопровождается понижением электрического сопротивления слизистой преддверия влагалища и часто совпадает с оптимальным временем осеменения.	Снижение электрического сопротивления преддверия влагалища наблюдается при некоторых заболеваниях половых органов, после мочеиспускания, при авитаминозе и др. Кроме того, приборы не всегда дают верные показания.
Ультразвуковой	Ультразвуковое исследование степени развития предовуляторного фолликула.	С помощью прибора для ультразвукового сканирования исследуют степень развития предовуляторного фолликула.	Необходимость наличия дорогостоящей аппаратуры.

Способы искусственного осеменения коров и телок:

Разработка способов искусственного осеменения коров и телок базируется на трех основных положениях:

Во-первых: Крупный рогатый скот принадлежит к животным с влагалищным типом осеменения, т.е. при естественном половом акте сперма самца изливается в переднюю часть влагалища. Шейка матка, при этом, выполняет всасывающую функцию - своим сокращением она как-бы втягивает сперму внутрь. Кроме того, шейка матки у крупного рогатого скота выполняет функцию промежуточного сберегателя спермиев. В ней создается некоторое депо спермиев, которые затем порциями поступают в матку. Этим определяется то, что сперма быков должна быть введена в переднюю часть влагалища, как можно ближе к вагинальной части шейки матки. В одной дозе для осеменения должно быть не менее 10 млн. активных спермиев с поступательным движением.

Во-вторых: При естественном половом акте количество спермиев, вводимых во влагалище животного очень велико, в то время как при искусственном осеменении количество спермиев в одной дозе значительно меньше. Как показали исследования, 95% спермы, поступающей при естественном половом акте, гибнет, и только 5% попадет в шейке и сохранят там свою жизнеспособность. Следовательно, при искусственном осеменении вся доза должна быть введена непосредственно в шейку матки.
В-третьих: Стенки влагалищ рожавших коров вследствие их растяжения при беременности образуют складки, или кармашки, что требует необходимости точного знания локализации влагалищного отверстия шейки матки при искусственном осеменении.

Эти три фактора определяют существование четырех способов искусственного осеменения крупного рогатого скота.

Эпицервикальный способ осеменения.

Название способ получил по греческим словам "эпи" - около и "цервикс" - шейка. Иными словами - введение спермы как можно ближе к каналу шейки матки. Таким образом, при таком способе осеменения частично имитируется естественный способ, при котором сперма изливается как можно ближе к влагалищному отверстию канала шейки матки. Используется только при осеменении телок.

Возможность применения этого способа обусловлена отсутствием у телок растягиваний (кармашек) влагалища. Это определяет то, что при глубоком введении катетера кончик его почти совпадает с влагалищным отверстием шейки матки. В этом случае вводимая сперма изливается на влагалищное отверстие шейки матки и, при стимуляции ее всасывающей функции путем легкого массажа клитора, попадает в канал шейки матки.

В набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая ампула для спермы или пластмассовый шприц, стерильный полистероловый катетер 35-40 см. В одной дозе для осеменения должно быть не менее 10 млн. активных спермиев с поступательным движением.

Техника осеменения коров:

Недостаток способа: применяется только для телок. Показатель оплодотворяемости телок - около 60-70%.

Маноцервикальный способ осеменения коров.

Название способ получил по греческим словам: "мано" - рука и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение в канал шейки матки c контролем локализации влагалищного отверстия шейки матки рукой. Применяется только для осеменения коров.

В набор инструментов входят:

стерильная полиэтиленовая ампула для спермы, стерильный катетер (10 см), полиэтиленовая или резиновая перчатка. Техника способа:

Животное фиксируют.Подготавливают инструменты. Для этого полиэтиленовую ампулу присоединяют к катетеру. Проводят размораживание и оценку спермы по определенной методике. Затем ампулу сдавливают для удаления из нее воздуха и засасывают порцию замороженно-оттаяного или свежеразбавленного семени. После тщательного туалета наружных половых органов коровы на руку одевают перчатку, омывают ее стерильным физиологическим раствором или 2,9%-ным раствором цитрата натрия , осторожно вводят руку во влагалище проверяют состояние и делают легкий массаж шейки матки. Затем другой рукой подают заряженую порцией спермы ампулу с катетером и под контролем указательного пальца подталкивают катетер до тех пор, пока он не будет введен в шейку на глубину 5-6 см. Затем выдавливают содержимое ампулы. Осторожно вытягивают руку и 1-2 минуты делают легкий массаж клитора для стимуляции всасывающей функции шейки. На последнее обстоятельство следует обратить особое внимание, так как легкий массаж клитора способствует не только сокращению шейки матки, но и стимулирует выход (овуляцию) яйцеклетки, уменьшая таким образом вероятность задержки овуляции и яловость. Недостаток способа: невозможность использования для осеменения животных с узким влагалищем. Показатель оплодотворяемости - 65-70 %.

Визоцервикальный способ осеменения коров.

Способ получил название по греческим словам: "визо" - смотрю и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение с визуальным контролем локализации шейки матки.

В набор инструментов входят: влагалищное зеркало с осветителем, шприц-катетер разных конструкций.

Техника способа:

Животное фиксируют. Инструменты готовят в лаборатории пункта, где на столе располагают пронумерованные стеклянные банки емкостью 100 мл с притертыми крышками. В банки 1, 3 и 4 наливают свжеприготовленный стерильный раствор 2,9%-ного лимоннокислого натрия (цитрата натрия), в банку 2 - 70%-ный спирт; раствор в банках 3 и 4 должен быть теплым (38-40 градусов), чтобы шприц нагревался перед наполнением его спермой.

Шприц обрабатывают отмыванием раствором из банки 1, затем обеззараживают спиртом из банки 2, затем промывают растворами из банок 3 и 4.

Набрав порцию замороженно-оттаянного или свежеразбавленного семени в шприц, его держат вертикально, катетером вверх. Влагалищное зеркало увлажняют теплым 1%-ным раствором хлорида натрия или пищевой соды, затем вводят его во влагалище, предварительно раскрыв половые губы рукой. При введении во влагалище зеркало держат ручками в сторону. После введения ручки зеркала поворачивают вниз. Осторожно раскрывают зеркало и, отыскав отверстие шейки матки, вводят в него шприц-катетер на глубину 5-6 см. Медленно, нажимая на поршень шприца, выдавливают сперму. После этого шприц-катетер, а затем и зеркало осторожно извлекают. При осеменении нескольких коров спермой одного быка наружную поверхность катетера после каждого животного обязательно дезинфицируют спиртовым тампоном.

Влагалищное зеркало после осеменения каждой коровы моют теплым 2-3%-ным раствором пищевой соды, вытирают насухо и протирают. Если есть возможность зеркало прожаривают в жаровом шкафу.

Недостаток способа: возможность нанесения травм стенкам влагалища при неосторожных манипуляциях с зеркалом. Показатель оплодотворяемости - 50-60 %.

Ректоцервикальный способ осеменения коров.

Способ получил название по греческим словам: "ректа" - прямая кишка и "цервикс" - шейка. Иными словами - осеменение с контролем локализации шейки матки через прямую кишку. Наилучший способ осеменения, так как при этом обеспечивается точное введение спермы в канал шейки матки, а также одновременный массаж половых органов животного.

В набор инструментов входят: стерильная полиэтиленовая ампула для спермы или пластмассовый шприц, стерильный полистероловый катетер 35-40 см с полиэтиленовым чехлом, полиэтиленовая перчатка.

Техника_способа:

Животное фиксируют. Подготавливают инструменты. Для этого полиэтиленовую ампулу или шприц присоединяют к катетеру. Проводят размораживание и оценку спермы по определенной методике. Затем ампулу сдавливают для удаления из нее воздуха и засасывают порцию замороженно-оттаяного или свежеразбавленного семени. После тщательного туалета наружных половых органов коровы на руку одевают перчатку, омывают ее стерильным физиологическим раствором или 2,9%-ным раствором цитрата натрия. Другой рукой раздвигают половые губы вводят катетер во влагалище. Во избежание попадания в отверстие мочеиспускательного канала катетер сначала провдвигают снизу вверх и вперед, далее горизонтально до упора в шейку матки. Руку в перчатке вводят в прямую кишку, фиксируют шейку матки между указательным и средним пальцами. Большим пальцем прощупывают отверстие канала шейки и вводят туда катетер. Некоторую трудность представляет фиксация отверстия шейки из-за ее несколько большего диаметра по сравнению с диаметром самой шейки. Чтобы преодолеть это можно, ухватив шейку, слегка подтянуть ее на себя. Повторив эту процедуру 2-3 раза, добиваются расслабления шейки и возможности захвата влагалищного отверстия шейки путем последовательных перехватов ее по длине. При попадании катетера в канал шейки матки вращательными движениями шейку натягивают на катетер. Катетер продвигают в шейку насколько возможно глубже. Наилучшим приемом есть прохождение катетером всей шейки и выдавливание спермы в полость тела матки. После этого руку осторожно извлекают из прямой кишки. От катетера отсоединяют шприц или ампулу. Затем катетер начинают осторожно и медленно вытягивать, сопровождая эту процедуру легким массажем клитора. Визуально наблюдают всасывание остатков спермы из катетера, что является подтверждением наличия всасывающей функции шейки. После извлечения катетера массаж клитора продолжают еще 1-2 минуты. После осеменения животному обеспечивают покой.

Недостаток способа: необходимость высокой квалификации оператора. Вероятность травм канала шейки при неосторожных манипуляциях катетером. Показатель оплодотворяемости - около 70-75 %.

Способы диагностики стельности коров и телок.

На сегодня достаточно разработанными являются три способа определения стельности коров и телок:
• Гормональный
• Ректальный
• Ультразвуковой

Гормональный способ определения стельности коров и телок

Базируется на определении уровня гормона прогестерона в крови или молоке животных. С момента овуляции у самок на месте овулировавшего фолликула формируется временная гормон-синтезирующая железа - желтое тело. При наступлении беременности эта железа не дегенерирует как в случае полового цикла не завершившегося беременностью, а продолжает свое развитие. Она является местом нарастающего синтеза гормона прогестерона, который играет важную роль в поддержании беременности. Наивысшая концентрация этого гормона отмечается на месяц стельности, после чего уровень гормона несколько снижется. Наличие стельности определяют по уровню данного гормона в крови животных на 18-22 день (день предположительной охоты при неуспешности оплодотворения.

Уровень гормона прогестерона в крови беременных животных составляет - 12-20 и выше нг/мл. Уровень этого гормона в стадию половой охоты составляет - 0,1-0,5 нг/мл.

Недостатком данного метода является значительная вариабельность показателя содержания прогестерона у различных животных. Кроме того, аналогичная картина повышения содержания прогестерона в крови наблюдается при персистенции желтого тела, которое возникает как результат нарушения механизма лютеинизации желтого тела.

Ректальный способ определения стельности коров и телок

Наиболее доступный способ определения стельности. Способ заключается в прощупывании матки и рогов матки через прямую кишку с целью определения ее морфологии.

Состояние самки	Наблюдаемые признаки
Отсутсвие стельности.	У бесплодной коровы при ректальном исследовании выявляются следующие характерные признаки: Шейка, тело, рога матки и яичники расположены в тазовой полости (у животных много рожавших старая матка может опускаться в брюшную полость и при отсутствии беременности). При пальпации матки ясно прощупываются межроговая борозда и симметрично расположенные, равной величины, одинаковой формы и консистенции рога матки. Если рукой поглаживать поверхность матки, рога сокращаются, они становятся упругими и даже почти твердыми. Сокращенная матка ощущается в виде полушаровидного, гладкого образования, разделенного на две симметричные половины межроговой бороздой и бифуркацией. В момент сокращения удобно сопоставить величину и форму рогов матки.
Один месяц беременности.	Шейка матки в тазовой полости, рога располагаются на конце лонного сращения или несколько опускаются в брюшную полость. На поглаживание рукой матка не реагирует или сокращение рогов выражено слабо. Рог-плодовместилище несколько больше свободного рога, рыхлой консистенции, содержит до 100 мл жидкости, возможна его флюктуация. Яичник рога-плодовместилища больше яичника свободного рога, в нем, как правило, хорошо прощупывается желтое тело.
Второй месяц беременности.	Плод достигает 6-7 см в длину. Шейка матки из середины тазовой полости перемещается к входу в таз. Рог-плодовместилище вдвое больше свободного рога, вмещает 0,3-1 л жидкости. При его пальпации ощущается тугая флюктуация, распространяющаяся иногда и на свободный рог. Ткани обоих рогов дрябловатые, мягкие, сочные. Рога почти не сокращаются при их поглаживании. Межроговая борозда несколько сглажена, но все же достаточно хорошо выявляется. Форма и положение яичников те же, что и в первый месяц беременности, кроме желтого тела иногда можно прощупать фолликулы.
Третий месяц беременности.	Размер плода - от 14 до 16 см, иногда его можно прощупать. Рог-плодовместилище в 3-4 раза больше свободного рога, поэтому межроговая борозда не прощупывается. Матка представляется флюктуирующим пузырем со слабо ощущаемыми контурами величиной с голову взрослого человека: ее легко принять за мочевой пузырь. Однако нахождение шейки матки, установление ее тесной связи с флюктуирующим образованием и, наконец, выявление бифуркации рогов в области краниального (заднего) участка матки позволяет убедиться в том, что пальпируемое образование - матка, а не мочевой пузырь. Появляются карункулы величиной с фасоль. Форма яичников та же, они располагаются впереди лонного сращения на нижней брюшной стенке. Четко ощущается пульсация средней маточной артерии, которая достигает 8-10 мм в диаметре.
Четвертый месяц беременности.	Размер плода достигает 24-26 см. Матка в брюшной полости, шейка - у входа в таз или несколько опущена в брюшную полость. Матка ощущается в виде слабо наполненного жидкостью, флюктуирующего тонкостенного мешка, в котором иногда прощупывается плод и, как правило, карункулы величиной с лесной орех или боб. Беременный рог увеличен в 3,5-4 раза и приближается по размерам к небольшому арбузу. Средняя маточная артерия в беременном рогу достигает диаметра 10-12 мм и вибрирует (звенит).
Пятый месяц беременности.	Беременный рог увеличивается в 4,5-5 раз и глубоко опускается в брюшную полость. Поэтому плод не всегда доступен для пальпации. Карункулы достигают размера желудя (2-4 х 2-5 мм). Ясно ощущается вибрация средней маточной артерии со стороны рога-плодовместилища. Артерия свободного рога без изменений или слабо вибрирует. Для выявления плода проводят бимануальное исследование. Одну руку вводят во влагалище и, захватывая шейку матки, подтягивают матку ближе к тазовой полости. Другой рукой, которую вводят в прямую кишку, выявляют отдельные части плода и карункулы.
Шестой месяц беременности.	Плод длиной до 50 см. Матка с плодом лежит глубоко в брюшной полости. Плод обычно не прощупывается, будучи смещен далеко вперед вниз. Свободно выявляются карункулы величиной с небольшое куриное яйцо. Стенка матки слабо напряжена, поэтому иногда флюктуация почти не ощущается. Сильно выражена вибрация средней маточной артерии рога-плодовместилища и слабо средней маточной артерии свободного рога. Диаметр средней маточной артерии беременного рога достигает 15-18 мм.
Седьмой месяц беременности.	Плод достигает длины 70 см. Матка лежит глубоко на нижней стенке брюшной полости и ощущается в виде бугристого тяжа, идущего по нижней брюшной стенке от лонного сращения. Шейка также опущена в брюшную полость. Карункулы достигают размера от куриного до утиного яйца. В этот срок размер карункулов наибольший: длиной 2,8-11,5 см, шириной 1,8-7,8 см и толщиной 0,5-1,9 см. Ясно выражена вибрация обеих средних маточных артерий. Иногда прощупывается вибрация задней маточной артерии со стороны рога-плодовместилища.
Восьмой месяц беременности.	Плод достигает величины 80 см. Легко прощупываются отдельные части плода. Шейка матки расположена у входа в тазовую полость или в тазовой полости. Величина карункулов колеблется в пределах от мелкого до крупного куриного яйца. Хорошо вибрируют обе средние маточные артерии, и очень ясно задняя маточная артерия беременного плода.
Девятый месяц беременности.	Размер плода интенсивно увеличивается. Его части вклиниваются в тазовую полость. Шейка матки находится в тазовой области. Средние и задние маточные артерии вибрируют с обеих сторон. Возникают внешние признаки родов (припухание вульвы и молочной железы, расслабление и западание маточных связок, появление молозива). Молозиво в молочную железу может подойти за 1-2 дня до родов.

Ультразвуковой способ определения стельности коров и телок

Способ заключается в ультразвуковом тестировании состояния матки и рогов матки с помощью прибора для ультразвукового сканирования (т.н. УЗ-сканера). Это - наилучший способ тестирования стельности, который позволяет обнаруживать наличие зародыша в матке уже на 21-22-ой день. К этому дню у зародышей коров обнаруживается сердцебиение плода, которое хорошо видно на приборе. Применение этого способа позволяет диагностировать наличие стельности у животных, у которых она в дальнейшем может завершаться резорбцией (рассасыванием) плода. Недостатком данного способа является то, что его применение возможно при ранних (до 3-х месяцев) сроках стельности, т.к. позже плод становится слишком большим и, кроме того, опускается в брюшную полость, уходя из рабочей зоны датчика прибора.
Ниже приводятся результаты УЗ-сканирования половых путей коровы после искусственного осеменения.

	25 дней после осеменения. Видна полость рога матки, четко различимые стенки рога и зародыш на дне рога.
	34 дня после осеменения. Четко виден зародыш размером 1,3-1,7 см. К этому сроку хорошо диагностировалось сердцебиение плода.
	47 дней после осеменения. Хорошо видна зародышевая оболочка вокруг плода.